Kémia | Biokémia » Transzamináz enzimek szérumból való meghatározása

BIOKÉMIA II – GYAKORLAT Transzamináz enzimek szérumból való meghatározása  Transzaminázok   Az aminosavak α-aminocsoportjainak α-ketosavakra való transzferét az aminotranszferázok (transzaminázok) katalizálják, melyek prosztetikus csoportja a piridoxál-foszfát. Az orvosi diagnosztikában nagy jelentőségű az aszpartát-aminotranszferáz (ASAT vagy (S)GOT  glutamát-oxálacetát transzamináz) illetve az alaninaminotranszferáz (ALAT vagy (S)GPT  glutamát-piruvát transzamináz).  ASAT vagy SGOT:  különösen a májban és a szívizomban magas  aszpartát + α-ketoglutarát  OA + glutamát  ALAT vagy SGPT:  főleg a májban, de a vesében szívben és vázizomban is kimutatható  alanin + α-ketoglutarát  piruvát + glutamát  Ezek az enzimek akkor mérhetők a sérumban, ha az említett szövetek sérülnek, és a sejtek

citoplazmájából kikerülnek. Ha a SGPT/SGOT > 1.3, akkor a máj betegségére utal, ha <13, akkor AMI-ra   A meghatározás elve  ASAT vagy SGOT  aszpartát + α-ketoglutarát  OA + glutamát  az oxálacetát továbbalakítható a malát-dehidrogenázzal (MDH)  OA + NADH+H+  malát + NAD+  a NADH fotometrálható, így annak fogyása (extinkciócsökkenés) SGOT aktivitásra utal       „AS”-reagens  puffer, aszpartát, MDH, NADH, α-ketoglutarát serum (beteg és normál) a mintát összekeverjük küvettába, majd 340 nm-en olvassuk le az extinkciót deszt. vízzel szemben az extinkció változását figyeljük 5 percen át, és ábrázoljuk grafikusan az egészéges minta lineáris, a beteg csökkenő görbe (fogy a NADH) az enzimaktivitást IU egységben adjuk meg (1 m enzim által átalakított aszpartát mennyisége 1 perc alatt) BIOKÉMIA II – GYAKORLAT

 ALAT vagy SGPT  alanin + α-ketoglutarát  piruvát + glutamát  a piruvát továbbalakítható laktáttá a laktát-dehidrogenáz (LDH) által  piruvát + NADH+H+  laktát + NAD+  a NADH fotometrálható, annak fogyása (extinkciócsökkenés) SGPT aktivitásra utal       „AL”-reagens: puffer, alanin, LDH, NADH, α-ketoglutarát serum (beteg és normál) a mintát összekeverjük küvettába, majd 340 nm-en olvassuk le az extinkciót deszt. vízzel szemben az extinkció változását figyeljük 5 percen át, és ábrázoljuk grafikusan az egészéges minta lineáris, a beteg csökkenő görbe (fogy a NADH) az enzimaktivitást IU egységben adjuk meg (1 m enzim által átalakított aszpartát mennyisége 1 perc alatt)