Biológia | Genetika » Energia tároló és felszabadító kompartmentek

Energia tároló és felszabadító kompartmentek Genetikai, Sejt és Immunbiológiai Intézet Semmelweis Egyetem 1 Energia tárolás és felszabadítás Szik Glikogén Lipid cseppek Aminosavak Glukóz-P Lipidek Glikolízis ATP Terminális oxidáció Mitokondrium Citromsav ciklus Citoszól 2 Lipidcseppek megfigyelése Citológiai festések 3 Negatív lipid festés MGG (Sejttenyészet) 4 HE, Hepatocirrhosis (zsírmáj) zsírcsepp Kontroll máj⇒ 1. nucleus 5 Fizikai festés (színezés) Olajvörös 6 Szudán-fekete (fizikai) festés, CML (krónikus mieloid leukémia) vérkenet 7 Lipidcseppek megfigyelése TEM 8 Lipidcseppek mitokondri -umokkal társulása csöves A lipidcseppek (LD) tartalma a dehidrálás (pl. aceton) során kioldódott. 9 Lipidcsepp társulása SER-rel A lipidcsepp (LI) tartalma a dehidrálás (pl. etanol) során kevésbé oldódott ki. 10 Glikogén megfigyelése 11 PAS reakció máj metszetben

12 Glikogén szemcsék májsejtben 13 A glikogén szemcse szerkezete A glikogén és a lipidcseppek felszínén enzimek működnek: leépítés Molecular Biology of the Cell, 3rd edn. beépítés 14 PAS reakció (+magfestés) izomban 15 Glikogén szemcsék (↑) izomsejtben 16 Mitokondrium és peroxiszóma Fény és elektronmikroszkópos megfigyelése 17 Fáziskontraszt mikroszkóp A mitokondriumok fénymikroszkóppal is kimutathatók Paraffinos metszet félvékony metszet 18 Immuncitokémia Mitochondria = red, Golgi = green, nucleus = blue 19 A mitokondrium kompartmentalizációja 20 Harántkrisztás mitokondriumok, TEM 21 Csöves mitokondriumok 22 Mitokondrium, fagyasztva maratás 23 Bazális csíkolat 24 Mitokondriumok társulása bazális testtel 25 Mitokondriumok társulása ostorral 26 Mitokondriumok társulása myofibrillomokkal 27 Mitokondriumak a diagnózisban Mitokondriális eredetű

izomdegeneráció Abnormális mitokondriumok egy beteg gyermekből 28 Peroxiszóma cristalloid matrix 2H2O2 2H2O + O2 29 Összefoglalás M Ps M M Gl SER M Gl = glikogén, M = mitokondrium, Ps = peroxiszóma, SER = sima30ER A sejtaktivitás mérése a mitokondriális dehidrogenáz aktivitáson keresztül Felhasználás: sejtszám vagy aktivitás meghatározás 31 Az MTT-formazan reakció elve Mitochondrial dehydrogenases NADH + Tetrazolium + ⇒ NAD+ + Formazan 32 MTT-formazan kristályok sejtekben és oldódás után a Élő sejt Halott sejt Haldokló sejt 33 Preparátumok 34 [29] Máj, PAS 35 [34] CHO, Olajvörös 36 Kapcsolódó irodalom • Darvas Zs., László V: Sejtbiológia, Egyetemi jegyzet • VIII és IX. fejezet • Csaba Gy., Madarász B: A sejt szerkezete (2003) • 7.3 Fejezet • Fülöp A. K(Szerk): Biológiai gyakorlatok, Egyetemi jegyzet (2005) • 8.2, 84 fejezet, 3A1, 3B7 fejezet • Fülöp A. K(Szerk):

Biológiai gyakorlatok, Egyetemi jegyzet (2001) 37 • 7.2 fejezet, 3A1, 3C4 fejezet